为什么卯木不能生丁火

動物血清
動物血清基本信息
分類:除特別說明外,本章所介紹的產品僅限研究之用。不得將這些產品用于疾病診斷。這些產品在疾病診斷或者其他臨床應用中的安全性和有效性目前尚不明確。標有“供體外診斷之用”的產品為醫療器械,須符合美國聯邦法典第 21 章第 820 節質量體系規定的要求。這些產品也可用于研究,在適當情況下可作為原料成分用于進一步的生產過程。最終用戶有責任鑒別這些產品是否適合其具體用途。我們未認定這些產品可用于動物或人的治療,也未計劃將產品用于上述用途。
價值與信任鑄就的歷史
50 多年來,研究人員依靠 GIBCOR 血清在體外復制出可供細胞生存、增殖和分化的生理環境。與細胞培養基、平衡鹽溶液、無血清培養基和試劑一樣,我們的優質血清也是您最佳的選擇。
GIBCO® 垂直整合式血清生產
我們可以對 GIBCOR 血清的整個生產過程進行監督。我們利用專業的設備、涵蓋從血清采集到最終產品驗證全部過程中每個環節的標準操作規程以及連續不斷的內部審核,確保每個生產環節的產品質量都能得到監督。通過對整個生產過程的監控,確保產品始終具有穩定、優秀的品質,同時還可降低批次間的差異。
胎牛血清的產地
隨著研究界和生物制藥公司越來越認識到胎牛血清 (FBS) 來源全球化的問題,我們相應地提供了原產地不同的多種胎牛血清供客戶選擇。除了提供產自美國的胎牛血清外,我們還提供產自其他符合美國農業部 (USDA) 進口要求的國家 (例如:墨西哥、新西蘭*、澳大利亞和中美洲國家) 的胎牛血清產品。所有胎牛血清產品均符合嚴格的質量控制標準和 USDA 相關進口要求。這種產地區分使用戶能夠在知情的情況下做出購買選擇,而且也使產品價格更具彈性。
GIBCOR 胎牛血清及其他反芻動物血清均采自美國或者由 USDA在美國聯邦法典第 9 章第 94:18 節 (“因牛海綿狀腦病限制反芻動物肉類和食用產品進口”) 中所列國家之外的地區進口。這些受限國家均報告過牛海綿狀腦病病例 (BSE) 或者可能有隱匿的牛海綿狀腦病
病例。這符合目前 FDA 關于在美國范圍內將反芻動物血清用于受管制產品生產的建議。此外,進口國家還必須無口蹄疫和牛疫疫情。產地不同的 GIBCOR 胎牛血清絕不會互相混合。
可追溯性:血清質量的保證
每批 GIBCOR 血清的分析證書中均注明了該血清的原產國。此外,還有翔實的文檔記錄證明每批血清的采集、加工、測試和運送過程,對產地信息提供全面的支持。這種可追溯性就是血清質量的證明。
采集
胎牛血清的采集采用心臟穿刺法。馬血清采自精心飼養的供體動群體,新生牛血清采自大約 10 至 14 天大的動物。所有血清均按照行業標準采集。
加工
所有血清。采集的血液均在冷藏溫度下加工。血清與血凝塊分離后,立即收集并凍存起來。只有符合我們原材料標準的血清才可用于生產。熱滅活血清。將檢查合格的血清放入 56°C 恒溫控制的水浴中,熱滅活 30 分鐘。超低免疫球蛋白 G (IgG) 胎牛血清。我們利用獲的色譜技術去除胎牛血清中的 γ-球蛋白 (GG)。利用該技術可以生產出 IgG 含量極低 (<5 μg/ml) 的胎牛血清,同時又可保留血清的全部生物學活性。透析血清。利用截止分子量為 10,000 的濾器和 0.15 M NaCl 對血清進行透析,直至用鄰甲苯胺試驗測定葡萄糖含量低于 5 mg/dl 時為止。1,2 正切流動過濾 (TFF) 工藝使血清的加工和最終過濾可在同一天完成。炭吸附胎牛血清。Invitrogen 公司通過獲的炭/葡聚糖處理技術提供優質的胎牛血清,該技術可降低血清內的激素和生長因子水平。這種血清 (基礎貨號:12676) 適用于要求血清內激素特別是雌二醇含量較低的研究人員。GIBCO 會對每批血清進行克隆形成率測定,以便監測批次間的品質差異。γ-輻照血清。我們可按照客戶要求對血清進行 γ-輻照。該工藝利用γ 射線滅活動物血清 (包括:胎牛血清、新生牛血清、豬血清和馬血清) 中的病毒和支原體,并已通過驗證。3 根據研究結果,建議使用30 至 45 kGy 的照射劑量。該劑量范圍符合日前頒布的歐盟和 FDA病毒滴度減低指南。4,5 以上述劑量 γ-輻照后,血清的理化性質和細胞培養性能均未改變。3 有關驗證結果的更多信息,請與 Invitrogen公司技術支持部聯系。
灌裝
通過一系列濾器對檢查合格的原料血清進行過濾加工。最終過濾步驟采用 0.2 μm 和 0.1 μm 孔徑的滅菌級濾器。胎牛血清經過三重 0.1μm 過濾,其他所有血清均經過 0.2 μm 過濾。
GIBCOR 血清采用無菌灌裝工藝制備,每個步驟均經過驗證,確保產品符合 10–3 無菌保證水平 (即:產品生產過程中的污染水平不超過千分之一的比例) 的業內標準。產品未經最終滅菌時無法達到最高的無菌保證等級 (≥10–6)。關鍵控制點包括:所有與產品接觸的物質均需要經過滅菌處理循環、采用細菌培養基配制技術進行常規培養基灌裝、全面的環境監測方案、經過驗證的清潔程序以及經過驗證的最終過濾器完整性測試方案。此外,過濾和分配過程均在經過 HEPA 過濾的正壓性環境控制房間內進行。
血清產品采用 GIBCOR E-Z Hold™ 塑料瓶包裝。灌裝后的容器被貼上標簽,在 –5°C 至 –20°C 的儲存溫度下進行隔離檢疫。全部質控測試結束并且血清符合最終產品標準后,產品方可出廠。產品失效日期:請參見產品標簽。
血清匹配和預定計劃
GIBCOR 血清的采集和加工方法經過細致驗證,極大降低了批次間的差異。但是,由于此產品來自動物,一些內在的生物化學差異不可避免。我們提供兩種免費的方式,幫助您避免這些微小差異對您的研究造成的不良影響。
iMATCH™ MPA 血清批次匹配工具
現在,Invitrogen 公司通過 iMATCH™ 工具解決了血清批次間差異這一難題,公司的胎牛血清專家可借助該工具幫助您找到品質最穩定或者性能最好的血清批次。iMATCH™ 采用算法,對分析證書性能參數進行 MPA 分析 (多參數分析)。
iMATCH™ 服務完全免費,屬 Invitrogen 公司獨有,而且可:
• 減少或避免血清測試,節省時間
• 按照血清性能而非來源進行選擇
• 減小細胞培養條件波動
• 增強您對研究結果的信心
有了 iMATCH™,Invitrogen 公司可以向您承諾,您每次拿到的血清絕對都是最適合您的優質產品。
除此之外,我們還將對用于以下細胞系的每批經過美國質量認定、認證以及 USDA 批準的血清進行增殖篩選研究試驗,進一步鑒定血清:
• CHO-K1 (倉鼠卵巢細胞) — 用于遺傳學、毒性篩查、營養學和基因表達特別是重組蛋白表達研究
• 293F (人胚腎細胞) — 用于慢病毒和反轉錄病毒載體的生產
• Jurkat (人 T 細胞白血病細胞) — 用于不同癌癥的藥物和放射敏感性差異研究;還可用于急性 T 細胞白血病和 T 細胞信號轉導研究;Jurkat 細胞的另一用途是它可生成 IL-2
• THP-1 (人單核細胞) — 用作研究巨噬細胞激活和多核化機制的模型
• ME-180 (人宮頸癌細胞) — 用作體內宮頸上皮的代表性模型,其形態與陰道和外宮頸上皮細胞類似
• A549 (人肺癌細胞) — 用于水、電解液和其他物質跨膜擴散的研究
上述數據只能通過 iMATCH™ 獲得,它也構成了每批血清的虛擬指紋。在您提出要求后,我們可借助 iMATCH™ 為您提供多種適合您需要的血清,使您可以專注于科學研究。
血清產品存在批次差異,但這并不意味著您的細胞培養工作也一定如此。
如欲了解有關預定血清測試計劃的更多信息,請與您的血清專家聯系或者登錄 www.lifetechnologies.com/imatch 。 如果您的培養體系極為敏感,可利用我們推出的預定血清測試計劃獲得一份樣品,在您的體系中進行測試。在您測試樣品期間,我們將為您保留預定數量的產品,直到您的樣品評估全部結束。血清產品一般可保留四周,但是如果您希望保留更長的時間,您可以在索要樣品時向我們說明。
最終產品質量控制
我們采用以下方法對每個生產批次中一定數量的代表性質控樣品進行分析:
化學檢查。我們利用冰點降低法測量血清的滲透壓,確保其符合產品規格。每天利用美國國家標準與技術研究院提供的標準溶液對所有滲透壓計進行校準。測量血清的 pH 值,以確保其符合產品規格。每天利用美國國家標準與技術研究院提供的標準溶液對所有pH 計進行校準。
監測血清的電泳圖譜,確認血清的特性和完整性。將樣品加入醋酸纖維素介質中,使其在緩沖系統中遷移。對薄膜條進行染色、透明、干燥,并用光密度計進行掃描,測定白蛋白和球蛋白組分的相對濃度。
為了確保血清采集和加工程序正確,需要利用改進的 Fleming 氧化血紅蛋白測定法 1對血紅蛋白進行分光光度測量。
隨著動物年齡的增大,總蛋白含量相應地成比例增加。為了確認動物年齡,確保其符合產品規格,我們利用自動化雙縮脲法測定血清總蛋白。利用色度計在不同波長下測定樣品與雙縮脲試劑結合后的吸光度。自動計算測定結果,并與標準曲線比較,計算蛋白含量值 (克/分升)。
穩定性測試項目。每件標有體外診斷 (IVD) 字樣的產品上標注的失效日期顯示了產品有效性能的維持時間。我們的穩定性測試項目可確定并驗證產品的失效日期。定期監測各批次產品,確定產品在建議儲存條件下性能達到合格標準的維持時間。微生物學檢測。我們利用最新版美國藥典 (USP) 推薦的方法確認血清中不含細菌和真菌。
對于所有血清,均利用 Barile 和 Kern 大規模接種法2 檢測其中是否含有支原體。該測試在推薦方法檢出限內具有很好的準確度。將樣品收集在一起后于肉湯內至少培養三周,并且至少在四塊支原體瓊脂平板上進行傳代培養。在 36°C ± 2°C 下,分別對平板進行有氧和無氧 (95% 氮氣,5% CO2) 培養。在測試期間,每周在顯微鏡下檢查瓊脂平板上的支原體生長情況。利用 Dienes 染料檢測疑有污染的瓊脂平板上有無支原體集落。然后重新對平板進行顯微鏡檢查。定期監測接種后的肉湯培養瓶,檢查其渾濁度和 pH 改變跡象。利用 Hoechst 熒光 DNA 染料3 對所有牛血清進行篩查,檢查其是否含有無法培養的支原體,以便檢測在推薦方法檢出限內無法用肉湯法培養獲得的支原體,例如:豬鼻支原體。
病毒檢測。利用美國聯邦法典第 9 章第 113.53 節“動物源性成分要求”規定的方法,確認血清中不含外來物質。
將此前已經證明不含已知外來物質的牛細胞培養物于含有 15% 受試血清的生長培養基中傳代培養三次,共 21 天。將此前已經證明不含外來物質的對照培養基和血清作為陰性對照,進行平行培養。在此期間檢查所有培養物中有無病毒導致的形態學改變或致細胞病變效應。在 21 天培養期的第 14 天,利用以下標準病毒檢測方法對含有受試血清的平行培養瓶進行評價。
對一瓶受試細胞進行胰蛋白酶消化,將細胞加到總表面積為 6 cm2的六室玻片上。同時制備平行陰性對照玻片。將牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)、牛細小病毒、牛腺病毒、狂犬病病毒和呼腸病毒加入到受試培養物的各個腔室玻片上,制備各個陽性對照。繼續培養 7 天后(共計 21 天),利用熒光抗體技術檢測病毒。
對受試培養物進行蘇木精-伊紅染色,觀察有無致細胞病變效應(CPE) 或者病毒誘導效應。檢查細胞中是否存在 CPE、包涵體、合胞體形成或者其他異常效應。
按照美國聯邦法典第 9 章第 113.46(b) 節規定的方法,檢測另一瓶細胞中人“O”型紅細胞、豚鼠紅細胞和日齡雛雞紅細胞的血細胞吸附 (HAD)。該試驗分別在 2°C 至 8°C 和 20°C 至 24°C 下進行。將此前已經感染了 PI-3 病毒的陰性對照細胞作為陽性對照。將未感染細胞作為陰性對照。
上述試驗可檢測在推薦方法檢出限內有無病毒污染。內毒素檢測。除新西蘭產胎牛血清以及其他血液和血清制品外,對所有胎牛血清均需通過鱟阿米巴樣細胞溶解物 (LAL) 試驗測定其內毒素水平。
新西蘭產胎牛血清采用以初始反應速率為基礎的顯色動力學試驗方法檢測產品中的內毒素濃度。
性能測試:胎牛血清 (FBS)
每個批次的胎牛血清 (基礎貨號:16000、10082、26140、16140、12483、10099、10100、10437、10438、16250 和 26400 [僅進行克隆形成/平板接種試驗] ) 均進行以下性能測試。選擇胎牛血清時最重要的標準是它能否支持特定細胞的生長。因此,除了確保每批胎牛血清均經過我們嚴格的質量控制測試外,我們還模擬實驗室條件,對每批血清進行以下三項重要的性能測試,即:克隆形成率、平板接種效率和二倍體成纖維細胞生長促進性能。1 這些專業性能測試方法可確保我們能提供適合上述三種用途的優質血清。這些試驗可確保我們為您選擇的每批胎牛血清在您的培養體系中產生最佳的效果??寺⌒纬陕试囼???寺⌒纬陕试囼灴煞治雒颗ヅQ鍖π∈蠊撬枇黾毎蛠碓从诠撬枇黾毎碾s交瘤細胞的克隆形成和生長的支持性能。以下細胞系已經過驗證可用于上述試驗:
• Sp2/0-Ag14 (ATCC # CRL 1581)
• P3x63-Ag8.653 (ATCC # CRL 1580)
每批胎牛血清均采用兩塊微孔板進行測試,并采用兩種血清濃度和兩種細胞接種密度 (10% 血清和 1 個細胞/孔,4% 血清和 5 個細胞/孔)。利用規定的參考血清對克隆形成率試驗結果進行標準化。高血清濃度試驗可代表多種常規雜交選擇方法,而低血清濃度試驗則更為嚴格,可提高對于各批次血清間細微變化的檢出。以 1 個細胞/孔的密度接種的嚴格試驗可模擬單一雜交體選擇的實驗室條件。每批胎牛血清附帶的分析證書上列出的克隆形成率數值為兩種測試條件下的平均值。
克隆形成試驗方法??寺⌒纬稍囼灢捎脙煞N胎牛血清濃度 (10% (v/v)和 4% (v/v)) 和雙份重復接種于 96 孔板上的兩種細胞接種密度進行。將此前經過質量認定的一批胎牛血清于上述每種試驗條件下進行測試,作為內部參考標準??寺⌒纬稍囼灣绦蛉缦拢?br /> 1. 將 Sp2/0-Ag14 (SP2) 和 P3x63-Ag8.653 (653) 細胞于含有 10% 胎牛血清的 RPMI 1640 培養基中常規培養至對數生長期。在顯微鏡下通過臺盼藍拒染法進行活細胞計數。
2. 利用 RPMI 1640 培養基采用連續稀釋法將原細胞懸液稀釋至所需的接種濃度,即:25 個細胞/ml 和 5 個細胞/ml。配制含有參考或受試胎牛血清的 RPMI 1640 培養基。在上述細胞密度下,每孔加入 0.2 ml 試驗用生長培養基時,每孔分別平均含有 5 個和 1個細胞。
3. 將 96 孔板在 36°C ± 2°C、充有 4–6% CO2 的加濕培養箱中培養大約 10 至 15 天。
4. 培養期結束后,肉眼觀察各微孔板,計數有克隆形成的孔數。按照如下公式計算克隆形成率:
克隆形成率 =平均陽性孔數/接種的總孔數*100
5. 按照如下公式計算相對克隆形成率 (RCE),從而對每批胎牛血清支持骨髓瘤指示細胞克隆形成的性能數據進行標準化:
RCE =受試血清克隆形成率/參考血清克隆形成率
平板接種效率試驗。平板接種效率試驗通過人轉化細胞系檢測各批血清是否適合連續貼壁細胞系的培養。試驗采用經過驗證可用于平板接種效率測定的 A549 細胞系 (人肺癌細胞系,ATCC # CCL 185),選擇此細胞系的原因是該細胞系可區分不同批次血清在支持細胞貼壁和增殖方面的微小性能差異。
每批胎牛血清均進行三次重復測試,并采用兩種血清濃度和兩種細胞接種密度 (10% 血清和 100 個細胞/孔,4% 血清和 200 個細胞/孔)。將細胞于 36°C ± 2°C 加濕 CO2 培養箱中培養大約 10 至 14天后,通過計數染色的細胞集落數確定其平板接種效率。利用參考對照血清對試驗結果進行標準化。兩種血清濃度可分別顯示該批血清在減血清和標準血清條件下支持細胞生長的能力。每批胎牛血清附帶的分析證書上列出的平板接種效率數值為兩種測試條件下的平均值。平板接種試驗方法。平板接種試驗可如上所述方法對各批血清進行檢測。該試驗中每個血清樣品使用一塊 6 孔板 (每孔面積為 9.6 cm2),可根據三個重復孔的數據計算平均值。將此前經過質量認定的一批胎牛血清于上述每種試驗條件下進行測試,作為內部參考標準。平板接種試驗程序如下:
1. 在 36°C ± 2°C 條件下,將 A549 細胞系于含有 10% 胎牛血清的DMEM 培養基中培養至匯合前期。
2. 向 22.5 ml 和 24 ml DMEM 中分別加入 2.5 ml 和 1 ml 胎牛血清,最終工作體積為 25 ml,從而配制出分別含有 10% (v/v) 和
4% (v/v) 血清的 DMEM 培養基。向 6 孔板的每個孔中加入含 5ml 血清的培養基。
3. 將培養的 A549 細胞進行胰蛋白酶消化,計數活細胞數,然后將細胞懸液稀釋至 2,000 個細胞/ml 的密度。
4. 向 200 個細胞/孔的孔中加入 0.1 ml 細胞懸液,向 100 個細胞/孔的孔中加入 0.05 ml 細胞懸液。將平板混勻后,置于 36°C ±2°C、充有 5% CO2 的培養箱中培養 10 至 14 天。
5. 培養結束后,取出平板,輕輕倒出生長培養基,然后用亞甲基藍甲醇溶液對集落進行染色。
6. 計數形成的集落數,按照如下公式計算平板接種效率:
平板接種效率 (%) =
每孔平均集落數/每孔接種的活細胞數× 100
7. 為了便于不同試驗間的比較,通過計算各受試血清的相對平板接種效率 (RPE) 對平板接種效率數據進行標準化,RPE 計算公式如下:
RPE =受試血清平板接種效率/參考血清平板接種效率
二倍體成纖維細胞生長促進試驗。生長促進試驗可通過多次傳代培養檢測每批胎牛血清對難養性人二倍體成纖維細胞的增殖支持能力。經過驗證,WI-38 細胞系 (人二倍體肺成纖維細胞系,ATCC #CCL 75) 可用于此試驗。
將 WI-38 細胞以低密度 (2 × 105/瓶) 雙份重復接種到 25 cm2 培養瓶中,瓶中培養基含有 5% 胎牛血清,并通過三次連續傳代培養(每代培養 7 天) 進行擴增。每次傳代時細胞接種密度均與最初接種密度相同。臨界分種率 (stressful split ratio)、群體倍增數和血清減低濃度是顯示各批次血清促進難養性二倍體細胞生長能力的嚴格指標。連續三次傳代培養可避免之前生長培養基的殘留效應,從而確保試驗真實反映各批血清的生長促進能力。每批胎牛血清附帶的許可證書中均列出了兩只第三代培養瓶中的平均細胞數。利用參考對照對試驗結果進行標準化。
二倍體成纖維細胞生長促進試驗方法。1 對人二倍體成纖維細胞 (WI-38) 在含有 5% 受試和參考血清的生長培養基中連續傳代培養三次時的生長狀況進行監測。試驗結果反映了在長期培養情況下各批血清促進 WI-38 細胞生長的能力,也可反映該批血清對難養性貼壁培養細胞是否有生長促進作用。生長促進試驗程序如下:
1. 配制含有 5% 受試血清或者此前經過質量認定的參考血清的生長培養基?;A生長培養基為含有 L-谷氨酰胺的 HBME:EBME (1:1)。按照要求,試驗期間每次更換培養液和傳代時均新鮮配制含有5% 血清的生長培養基。
2. 將 WI-38 細胞以低傳代水平 (2 × 105) 雙份重復接種至 25 cm2 培養瓶中,每瓶含有 9.5 ml 相應的生長培養基。將培養瓶瓶蓋松散地蓋在培養瓶上,將培養瓶置于充有 4–6% CO2、36°C ± 2°C的培養箱中培養 24 小時。然后將培養瓶蓋緊,在 36°C ± 2°C 下
培養 7 天,第 2 天或第 3 天補充完全培養基。
3. 第 7 天時,用胰蛋白酶消化法定量收獲每種參考或受試血清對應的兩只培養瓶中的細胞,然后將兩瓶細胞收集在一起并計數。將2 × 105 個 WI-38 細胞雙份重復接種至含有新鮮生長培養基的 25cm2 培養瓶中進行傳代培養,培養基中含有與前一代相同批次的參考或受試胎牛血清。按照第 2 步所述方法對培養瓶進行平衡和培養。
4. 按照上述方法繼續進行試驗,直至傳代三次,每代培養結束時計算含有參考或受試血清的培養瓶中的平均細胞數。最后一次傳代培養時各受試血清中的相對生長率 (RGR) 以參考血清中細胞生長率的百分數表示,計算公式如下:% RGR =受試血清每瓶平均細胞數/參考血清每瓶平均細胞數
Sf9 細胞生長試驗方法
1. 向此前經過驗證的 Grace 昆蟲細胞培養基中加入 10% 熱滅活的受試或參考胎牛血清,配制成完全測試培養基。
2. 將 Sf9 細胞原液加入 50 ml 離心管中,在 50 × g 離心力下離心
5 分鐘。用含有 10% 熱滅活的受試或參考胎牛血清的完全培養基對每只離心管進行重懸。
3. 將離心管上下顛倒數次后,從各只離心管中取出 1 ml 樣品。通過臺盼藍拒染法進行活細胞計數。
4. 如果細胞活力 ≥80%,則將離心管上下顛倒數次后從管中去除0.25 ml 樣品。然后利用 Coulter 計數器進行細胞計數。
5. 將細胞接種到 Erlenmeyer 培養瓶中,最終濃度為 2.75 × 105 個細胞/ml。接種后,再次進行細胞計數,以確保細胞密度在 2.5至 3.0 × 105 個細胞/ml 范圍內。
6. 將培養瓶置于振蕩器上,在 27°C ± 1°C 和 80–90 rpm 轉速下培養 96 小時。
7. 從每只培養瓶中取出兩份 0.25 ml 的樣品,利用 Coulter 計數器進行細胞計數。另取一份樣品進行細胞活力測定。
8. 通過將受試細胞密度與對照細胞密度進行比較,確定相對細胞數(RCN)。
其他試驗:經過認證 (美國)
除上述試驗外,對于基礎貨號為 16000、10082、10099 和 10100的產品,我們還進行了以下試驗。您將得到一份注明各項質量控制分析結果的分析證書。
噬菌體檢測。利用菌斑試驗檢測血清中有無噬菌體。3 從各批次血清中取出代表性樣品,加入含有噬菌體敏感性大腸桿菌 (C-3000 或K-12) 懸液的胰蛋白示磷酸鹽瓊脂中。然后將混合物涂布在胰蛋白示磷酸鹽瓊脂平板上,在 36°C ± 2°C 下培養大約 24 小時,然后觀
察平板上有無菌斑形成。
血紅蛋白測定
我們保證所有批次的經過美國認證的胎牛血清,其血紅蛋白含量 ≤15mg/dl,其中氧化血紅蛋白所占比例 ≥70%。
其他試驗:適用于胚胎干細胞的胎牛血清
GIBCOR 適用于胚胎干細胞的胎牛血清經過專業測試,可使胚胎干細胞維持未分化的細胞形態。
性能測試:其他血清
牛血清和新生牛血清。每批牛血清和新生牛血清 (請參見第 432-433頁的其他血清質量控制試驗) 均經過檢測,確保其能支持 VERO 細胞三次以上的傳代培養。每次傳代時細胞接種密度均與最初接種密度相同。將結果與利用對照生長培養基 (含有此前經過鑒定的參考血
清) 獲得的平行試驗結果進行比較。
馬血清。每批馬血清 (請參見第 432-433 頁的其他血清質量控制試驗) 均經過檢測,確保其能支持 Sp2/O-Ag14 (小鼠骨髓瘤) 細胞在含有受試批次血清的對照培養基中生長。將結果與利用對照生長培養基 (含有此前經過鑒定的參考血清) 獲得的平行試驗結果進行比較。
細胞毒性試驗:其他血清
從試驗設計角度而言,前一章所述性能測試方法也是嚴格的細胞毒性試驗。對于某些未經過性能測試的血清,我們專門測定了其細胞毒性。測定方法如下表所示。這些試驗可檢測受試樣品能否支持三種貼壁細胞系的貼壁和增殖。試驗期間監測受試和參考培養物種有
無營養缺乏、形態異?;蚣毎拘咱E象。
運輸
所有血清均經冷凍后置于干冰上快速運輸。
儲存和處理
將血清于 –5°C 至 –20°C 下儲存,在標簽所示失效日期之前使用。E-Z Hold™ 塑料瓶可于低至 –60°C 至 –70°C 的溫度下儲存。
避免反復凍融。如果可能需要反復凍融血清,應在無菌條件下將血清以適當的體積分裝至無菌容器中,并將其置于冷凍狀態下儲存。
 
 
 

为什么卯木不能生丁火